尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理研发的检测试剂盒，具备以下显著特点：

产品特点

1. 立即使用：用户只需提供样品DNA模板，无需额外准备。

2. 高灵敏度：经过优化的引物和其他组分确保了高效的灵敏度。

3. 阳性对照：产品提供阳性对照，有助于轻松区分假阴性样品。

4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌的高度保守DNA序列，避免与其他生物样本的DNA发生交叉反应。

5. 多功能性：既可用于定性检测，也可用于定量检测，定量检测的线性范围可达5个数量级。

6. 尺寸充足：本产品支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 科研专用：本产品仅限用于科研目的。

使用方法

一、DNA提取

采用自选方法提取和纯化样品DNA，本试剂盒兼容市场上大多数核酸提取试剂盒。

二、稀释标准曲线样品

为了防止污染，以下稀释操作应在独立区域进行：

1. 标记6个离心管，分别标记为7，6，5，4，3，2。

2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O，推荐使用带芯的枪头进行操作。

3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，冰上保存。

4. 依次交换枪头，在6号管中加入5μL 1×10E7拷贝/μL的阳性对照（来源于上步稀释），充分震荡以得到1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品，冰上保存。

5. 在5号管中重复上述操作，得到1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品，冰上保存。

6. 重复以上步骤，直到准备好6个稀释度的标准曲线样品，冰上保存。若无须制作标准曲线，阳性对照可稀释到1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制

待检样品数为N，则准备N+2个qPCR管，加入各成分，具体操作见说明书。

四、模板添加

向qPCR管中分别加入2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板和婴儿利什曼虫qPCR阳性对照，离心30秒后立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放入PCR扩增仪器中，按规定程序进行扩增，详细步骤请参阅说明书。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。通过待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值。

2. 若未制作标准曲线，则根据以下标准评判结果：阳性对照Ct值应<30且有明显指数增长，而阴性对照Ct值应为38或无Ct值，样本检测结果需根据Ct值<35（阳性）或34-38（待复检）进行判断。

运输及保存

本产品需在低温条件下运输，保存温度为-20℃，保存期限为一年。阳性对照需单独放置，以免污染其他试剂。

选择尊龙凯时，为您的生物医学研究提供可靠的支持和高质量的产品。